1. 色譜柱的安裝

1) 請將液相色譜裝置中的流動相完全置換后再連接色譜柱。

并且請完全排出流路內(nèi)的空氣。注意 裝置內(nèi)的液體和所使用的流動相不能相溶的情況下，請使用雙方都能相溶的液體做過渡。比如從水置換到氯仿的情況，就需要使用丙酮做過渡，才能完全置換。

注意：將鹽溶液置換成有機(jī)溶劑的時(shí)候，需要通過純水、丙酮的順序來進(jìn)行置換。相反，從有機(jī)溶劑轉(zhuǎn)換成鹽溶液的情況下，需要通過丙酮、純水的順序置換。

注意：不僅僅是泵，流動相流動的所有流路都必須進(jìn)行置換。例如，注入樣品的情況，軟管內(nèi)的液體也需要置換。另外，如果使用壓力計(jì)等別的軟管的情況，取下來的管子也必須由流動相洗凈后才能繼續(xù)使用。

2) 色譜柱保存方法不對或者長期不使用的情況下，色譜柱的出入口可能會有空氣殘留。這種情況下，必須先把空氣完全排出后才連接到裝置中。

注意：請避免快速加熱，并且注意加熱溫度不要超過色譜柱的最高負(fù)荷溫度。

參考：把柱子入口側(cè)的螺栓打開，然后加溫(一般加溫到手心感到溫暖的程度就足夠了)，等液體滿出來以后接到裝置上。然后，打開出口處的螺栓，用泵送液，等確認(rèn)出口處有液體流出后，連接到裝置中。這樣操作，就算后面再連接一根色譜柱也能完全除去空氣。

3) 請?jiān)诒眠\(yùn)作的時(shí)候連接色譜柱。確保能讓流動相按照色譜柱上箭頭的方向流動的狀態(tài)連接色譜柱。

4) 色譜柱加溫使用的時(shí)候，先用0.2～0.3mL/min的低流量一邊送液一邊升溫。達(dá)到所定溫度后，再漸漸的增加流量至測定流量。

5) 色譜柱需要安定時(shí)間。連接到裝置中立即進(jìn)行測試的情況下，第一次很難得到好的分析結(jié)果。

2. 色譜柱的取下和保存

1) 色譜柱加熱使用的情況下，先把流量下降到0.2～0.3mL/min，然后，繼續(xù)送液的同時(shí)慢慢的把色譜柱溫度降低到室溫。

2) 色譜柱溫度降低到室溫后，先停止泵，再把色譜柱從裝置中取下，擰緊兩端的螺栓。

注意：色譜柱購入時(shí)的封入液和流動相不同的情況，先用封入液置換，再取下色譜柱。

注意：為了不漏液，請擰緊色譜柱兩端的螺栓。

參考：室溫是指保管色譜柱的場所的溫度。

3) 色譜柱請放置于購入時(shí)的包裝盒內(nèi)，放在溫度變化少的地方(恒溫室最適合)進(jìn)行保存。

4) GPC、GFC色譜柱長時(shí)間保存的情況下，推薦使用液浸保存的方法。
這種情況，把色譜柱的出口端從裝置上取下，連接上外徑1/16英寸、內(nèi)徑0.8mm、長50cm的特氟龍軟管。
然后啟動泵，特氟龍軟管的前端有流動相流出后停止泵，把特氟龍管的前端浸入含有80ml浸入液的容積為100ml的瓶中。
把色譜柱的入口端從裝置上取下，擰緊螺帽放置在溫度變化少的地方保存。
參考：液浸保存的時(shí)候，每個月一次，色譜柱中的溶劑用新的溶劑置換一下能更長的保持色譜柱的性能。

5)3天內(nèi)會再次使用的情況下，不需要吧色譜柱取下進(jìn)行保存。

注意：容易析出的鹽溶液，腐蝕性的溶劑作為流動相的情況下，除了1天以內(nèi)保存的情況外，都需要用流動相把鹽溶液和腐蝕性溶劑置換后保存。

3. 使用保護(hù)柱的建議

1) 樣品中含有易于吸收填充劑的物質(zhì)或者使用被污染的樣品時(shí)，色譜柱的性能可能會急劇降低。這種場合推薦使用保護(hù)柱。

參考：保護(hù)柱能長久保持分析柱的性能，但不能提高分離性能。

2) 保護(hù)柱應(yīng)根據(jù)樣品的性狀、注入量，定期更換。

4. 樣品的前處理

1) 一般情況下樣品先用將使用的流動相溶解。

參考：使用不穩(wěn)定的流動相的場合，在注入前取出流動相溶解樣品。特別是使用示差折光檢測器的時(shí)候，為了減小溶劑峰此操作非常重要。

注意：使用梯度法的時(shí)候，樣品要先在最初的流動相中溶解。

注意：樣品沒有在流動相中溶解前，請不要注入色譜柱。
2) 為了去除流動相中的雜質(zhì)和不溶物，請使用0.5μm的過濾器過濾。

3) 使用固相提取用過濾器能達(dá)到很好的前處理效果。

5. 流動相

1) 為了去除流動相中的雜質(zhì)和不溶物，請使用0.5μm的過濾器過濾。

2) 流動相請充分脫氣后使用。

流動相使用超聲波，利用抽氣泵減壓脫氣。流動相脫氣不完全就使用示差檢測器進(jìn)行檢測的時(shí)候，有可能會無法得到安定的基線。

注意：加溫色譜柱使用的情況，為了避免色譜柱內(nèi)部和出口產(chǎn)生氣泡，脫氣尤其重要。

 

6. 色譜柱的檢定方法

出庫時(shí)附帶的色譜柱檢定報(bào)告的理論塔板數(shù)，是通過以下的方法求得的。

理論塔板數(shù)的測定條件請參考色譜柱的檢定條件。

圖表的繪制速度以每分鐘1.5～2.0cm為合適。調(diào)整檢測器的靈敏度使圖表上峰的高度在10cm左右。

7. 色譜柱的廢棄方法

廢棄的場合，請把色譜柱的內(nèi)容物(填充劑和流動相)取出，內(nèi)容物在焚燒爐中燒毀，把空的色譜柱丟棄。

8. 其他注意事項(xiàng)

注意 色譜柱收到?jīng)_擊可能會造成填充劑狀態(tài)改變從而導(dǎo)致色譜柱性能降低。請避免色譜柱從高處掉落。

注意 請不要彎曲色譜柱。

注意 打開色譜柱的終端部件可能會造成性能降低，絕對不要打開。

注意 開始啟動時(shí)和使用中，請避免急速的壓力和流量變化。為了延長色譜柱的壽命，請盡量使用配有減震器、或者沒有脈動的泵。